老鼠解剖:實驗大鼠小鼠的肉體剖檢診斷及有機組織樣品采集視頻
上期介紹了兩種采血的方法，這周為大家介紹小鼠的組織采樣，希望對大家的日常實驗工作有所幫助。以下視頻由ChristinaM. Parkinson等人制作。
對實驗動物進行安樂死后，對動物進行剖檢并采集關(guān)鍵臟器組織的樣品能夠幫助病理診斷及確定疾病感染原因，并且好的樣品采集方法能夠保障后續(xù)的病理診斷。我們本期的推文就是介紹如何進行大小鼠剖檢及組織樣品采樣，其中重點介紹四種比較難的器官組織樣品采集方法，包括：肺臟、大腦、腸系膜淋巴結(jié)和用于感染因子鑒定的呼吸道內(nèi)容物。
以下為采樣步驟：
一. 剖檢
-
對相關(guān)動物信息和外觀檢查的描述是動物剖檢的重要組成部分。
-
詳細的背景信息對后續(xù)的組織病理學的解讀非常重要。
-
準確描述安樂死前所觀察到的動物的狀況。
-
對安樂死的實驗動物進行稱重和其它測量。
-
必要時可采用錄像等信息記錄方式。
-
遵守安樂死與化學用品使用SOP。
二. 安樂死后心臟，肺臟，肝臟，腎臟和脾臟的檢查
-
在動物安樂死前準備必要的實驗用品。
-
簡要評估動物的狀況、行為和運動。觀察并記錄包括呼吸模式（例如：快、淺等）以及走動能力和步態(tài)（例如：跛行、盤旋、震顫等）。
-
根據(jù)所在機構(gòu)的SOP對動物實施安樂死。
-
評估動物的體表。
-
檢查所有外部孔道（耳朵、眼睛、鼻子、肛門、生殖器開口和口腔）。如需更仔細的檢查可使用使用解剖鏡。
-
將安樂死后的大小鼠以仰臥位放在干凈的解剖板或工作臺上。
-
使用剪刀，從肛門到下巴切開皮膚并切開腹壁，暴露腹部臟器，唾液和包皮/陰核腺，以及頸部和腋窩淋巴結(jié)。切開胸腔，露出并檢查胸腔內(nèi)臟器，在胸腔兩側(cè)橫向上方切兩個切口，然后在胸骨頂部橫向切開胸腔，打開足夠?qū)挼目臻g，徹底檢查肺的左右肺葉。
-
檢查肌肉骨骼外觀結(jié)構(gòu)。
-
評估所檢器官的異常情況。
-
觀察胃腸道內(nèi)容物，特別注意病變的胃腸道，腫塊和/或出血。
-
檢查泌尿生殖系統(tǒng)，檢測堵塞、液囊、出血或其他異常情況。
三. 剖檢后收集心臟、肝臟、腎臟和脾臟以進行組織病理學檢查
-
準備大小適合貼好標簽的容器并裝入適量的10％中性福爾馬林溶液備用。
-
將安樂死后的大小鼠以仰臥位置于干凈的解剖板上并暴露目標組織。
-
用鑷子和剪刀從剪取目標組織。
-
修剪組織去除脂肪和不必要的結(jié)締組織。
-
將組織放入裝有10％中性福爾馬林溶液的容器中。
四. 肺組織收集和灌注
-
準備大小適合貼好標簽的容器并裝入適量的10%中性福爾馬林溶液備用。
-
將安樂死后的大小鼠以仰臥位放在干凈的解剖板或工作臺上。
-
暴露氣管、心臟和肺部。
-
使用剪刀和鑷子去除覆蓋腹側(cè)胸部和頸部區(qū)域的皮膚和肌肉。
-
使用剪刀和鑷子在胸腔的兩側(cè)把肋骨邊緣打開，以暴露心臟和肺部的胸腔，然后穿過鎖骨附近的一個切口以打開足夠?qū)挼目臻g以徹底檢查左右肺葉。
-
切除從胸骨和肋骨延伸到下頜的頸部肌肉。
-
在肋骨的前緣下方插入剪刀，并在兩側(cè)各做一次切口，以去除覆蓋氣管的骨頭部分。
-
用鉗子抓住下顎附近的氣管，用鉗子放在鉗子上方，完全切開氣管。
-
使用鑷子輕輕向上拉氣管，用剪刀剪斷腹側(cè)組織連接，直到整個胸部組織從體內(nèi)移除。
-
將肺部平放在工作臺面上。
-
在氣管周圍系上一根線但不拉緊。
-
在注射器中注入固定液并連接一根小到足以進入氣管的針頭。
-
將針頭插入氣管開口，用鉗子夾住針頭周圍的氣管。開始用固定劑慢慢填充肺部。
-
填充肺部直至完全充氣。
-
從氣管上取下針頭。
-
收緊氣管周圍的縫線材料或繩子，以防止固定液從肺部回流。
-
將充氣的肺置于固定液中，固定液與組織的比例約為20：1。
五. 大腦的采集
-
準備大小適合貼好標簽的容器并裝入適量的10%中性福爾馬林溶液備用。
-
將安樂死后的大小鼠以仰臥位放在干凈的解剖板或工作臺上。
-
使用剪刀和鑷子去除覆蓋在顱骨上的皮膚和肌肉。
-
用剪刀將頭部完整取下。
-
使用小剪刀將底部插入枕骨，并沿顱骨的中線向上切割。
-
使用鑷子，反射顱骨暴露大腦的兩半。
-
輕輕顛倒頭骨，有助于腦組織脫出。
-
使用彎曲的鑷子，小心地沿著大腦的外緣和大腦下方滑動鑷子，剔除多余的組織和神經(jīng)使大腦與頭骨分離。
-
使用大約20：1的組織與固定劑的比例將大腦置于固定劑中。
六. 腸系膜淋巴結(jié)的收集
-
采集前對器械進行高溫高壓消毒。
-
準備無菌凍存管和無菌剪刀、鑷子。
-
將安樂死后的大小鼠仰臥位放在干凈的解剖板或工作臺上。
-
使用消毒的剪刀和鑷子將腹側(cè)腹壁從生殖器區(qū)切割到胸腔底部，去除皮膚和肌肉并暴露腸道。
-
腸系膜淋巴結(jié)沿著結(jié)腸位于腸系膜組織的腹腔中，緊鄰盲腸。
-
找到盲腸后定位腸系膜淋巴結(jié)。腸系膜淋巴結(jié)位于與盲腸相鄰的結(jié)腸的腸系膜中。
-
使用無菌操作和無菌器械摘取腸系膜淋巴結(jié)并放入標記的凍存管中。
七. 呼吸道吸出物的收集
1.準備所需實驗用品，包括無菌移液器、無菌剪刀和鑷子、無菌沖洗液及無菌工作臺。
2. 將安樂死后的大小鼠以仰臥位放在干凈的解剖板或工作臺上。
3.可通過氣管或鼻咽道繼續(xù)吸取。
4.大鼠推薦應(yīng)用氣管通道方法，操作如后。
-
剪開頸部皮膚暴露皮下組織。
-
去除唾液腺和頸部肌肉組織暴露氣管。
-
使用無菌器械，切開氣管以進入管腔。在整個收集過程中保持無菌（轉(zhuǎn)到步驟6）。
5.小鼠推薦應(yīng)用鼻咽通道（鼻吸出物和支氣管吸出物，由于氣管尺寸較?。?/span>
a.可以對鼻吸出物和支氣管吸出物進行該過程。
b.使用火焰滅菌或高壓滅菌器械，切斷顳下頜（下頜）關(guān)節(jié)，露出鼻咽口。
6. 將約1ml的取樣液吸入無菌移液管中。（轉(zhuǎn)步驟7或8，具體取決于收集的吸氣物。）
7. 支氣管吸出物：無菌地將移液管插入氣管腔并將取樣液慢慢注入支氣管和肺部。將取樣液從支氣管和肺中抽出，取出移液管，從移液管中取出取樣液。
8. 鼻吸氣：
無菌地將移液管插入鼻咽管（小鼠）或氣管腔（大鼠），進行頭部定向，并將取樣液緩慢注入鼻腔。
-
確保通過鼻腭與移液管尖端的接觸，或通過觀察進入腔內(nèi)的液體，在鼻孔可見的液體來到達鼻腔。
-
將取樣液從鼻腔抽出到移液管中，取出取樣液。
9. 無菌地將樣品轉(zhuǎn)移到適當?shù)呐囵B(yǎng)基或容器中進行測試。
八. 以下為小鼠解剖臟器分布圖
圖1. 小鼠的腹部和胸部器官。a）胸腺，b）心臟，c）肺，d）橫膈膜，e）肝臟，f）小腸，g）盲腸，h）膀胱。
圖2. 小鼠腹部和腹膜后器官。將腸和肝臟抬起并移動（或移除），可以看到以下器官。 a）肝臟，b）腸，c）胃，d）脾臟，e）腎臟，f）降結(jié)腸，g）子宮。
圖3. 雄性生殖器官。 a）精囊和凝固腺體，b）睪丸（從陰囊通過腹股溝環(huán)推入腹腔，在小鼠和大鼠中保持開放），c）膀胱，d）包皮腺，e）附睪。
圖4. 雌性生殖器官。 a）非妊娠子宮（小鼠和大鼠有雙子宮角）b）卵巢，埋在卵巢脂肪墊中，c）膀胱，d）陰核腺。
為便于大家的學習，我還為大家準備相關(guān)視頻
如果大家有什么想了解的實驗技術(shù)方法，請留言。我們將盡最大的努力找到相關(guān)的教材資料，滿足大家的要求。更多詳細內(nèi)容，可點擊閱讀原文。謝謝！
以上就是100唯爾(100vr.com)小編為您介紹的關(guān)于老鼠解剖的知識技巧了，學習以上的老鼠解剖:實驗大鼠小鼠的肉體剖檢診斷及有機組織樣品采集視頻知識，對于老鼠解剖的幫助都是非常大的，這也是新手學習農(nóng)林牧漁所需要注意的地方。如果使用100唯爾還有什么問題可以點擊右側(cè)人工服務(wù)，我們會有專業(yè)的人士來為您解答。
本站在轉(zhuǎn)載文章時均注明來源出處，轉(zhuǎn)載目的在于傳遞更多信息，未用于商業(yè)用途。如因本站的文章、圖片等在內(nèi)容、版權(quán)或其它方面存在問題或異議，請與本站聯(lián)系(電話：0592-5551325，郵箱：help@onesoft.com.cn)，本站將作妥善處理。
向客服提問老鼠解剖課程推薦
農(nóng)林牧漁熱門資料
農(nóng)林牧漁技術(shù)文檔
推薦閱讀
