復習必背——高中生物實驗大全(1)
最近到期末，很多同學留言需要關于生物實驗的知識點，周末就給大家準備了一份生物實驗大全，期末考試希望大家用得上。如果你考完了，也沒有關系，可以收藏了進行預習和復習喔！
一、用顯微鏡觀察多種多樣的細胞
1.實驗原理
(1)放大倍數(shù)的計算，顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。
(2)放大倍數(shù)的實質：放大倍數(shù)是指放大的長度或寬度，不是指面積或體積。
(3)高倍顯微鏡的作用：可以將細胞放大，更清晰地觀察到細胞的形態(tài)、結構，有利于區(qū)別不同的細胞。
2.操作步驟
[深度思考]
(1)如何區(qū)分目鏡與物鏡，其長短與放大倍數(shù)之間存在怎樣的關系？
提示 目鏡無螺紋，物鏡有螺紋。物鏡越長，放大倍數(shù)越大；目鏡越長，放大倍數(shù)越小。
(2)為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野中央，再換高倍物鏡觀察？
提示 低倍鏡下視野范圍大，而高倍鏡下視野范圍小，如果直接用高倍物鏡觀察，往往由于觀察的物像不在視野范圍內而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野中央，再換高倍物鏡觀察。
(3)如何把物像移到視野中央？
提示 物像在視野中偏向哪個方向，裝片就向哪個方向移動，簡稱“偏哪移哪”。
(4)若視野中出現(xiàn)一半亮一半暗；觀察花生切片標本材料一半清晰一半模糊不清，出現(xiàn)上述兩種情況的可能原因分別是什么？
提示 前者可能是反光鏡的調節(jié)角度不對；后者可能是由花生切片厚薄不均勻造成的。
(5)若所觀察視野中有“污物”，應如何判斷“污物”位置？
提示
[方法技巧]
1.關注顯微鏡使用的“4”個易錯點
(1)必須先用低倍物鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野中央，然后再換用高倍物鏡。
(2)換用高倍物鏡后，不能再轉動粗準焦螺旋，只能用細準焦螺旋來調節(jié)。
(3)換用高倍物鏡后，若視野太暗，應先調節(jié)遮光器(換大光圈)或反光鏡(用凹面反光鏡)使視野明亮，再調節(jié)細準焦螺旋。
(4)觀察顏色深的材料，視野應適當調亮，反之則應適當調暗。
2.顯微鏡下細胞數(shù)目的兩種計算方法
若視野中的細胞為單行，計算時只考慮長度和寬度；若視野中充滿細胞，計算時則要考慮面積的變化。
(1)若視野中為一行細胞，高倍鏡下細胞數(shù)量與低倍鏡下細胞數(shù)量之比等于其放大倍數(shù)之比的倒數(shù)。
(2)若視野中充滿細胞，則高倍鏡下細胞數(shù)量與低倍鏡下細胞數(shù)量之比等于其放大倍數(shù)之比的倒數(shù)的平方。
二、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質
1.實驗原理
2.實驗步驟
[深度思考]
(1)上述實驗選材的標準是什么？
提示 ①被檢測物質含量豐富；②材料接近無色；③易取材，易操作等。
(2)實驗中，在加相應試劑之前為何要留出部分組織樣液？
提示 作為對照，以便與鑒定后的樣液顏色作對比，增強實驗的說服力。
(3)鑒定還原糖時使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用？
提示 因為斐林試劑很不穩(wěn)定，容易產生藍色的Cu(OH)2沉淀，所以應將甲液和乙液分別保存，使用時現(xiàn)配現(xiàn)用。
(4)蔗糖溶液中加入斐林試劑后呈現(xiàn)什么顏色？
提示 蔗糖屬于非還原糖，不與斐林試劑發(fā)生顏色反應。觀察到的現(xiàn)象不是無色，而是藍色[Cu(OH)2的顏色]。
(5)在使用雙縮脲試劑時，為什么要先加入試劑A，后加入試劑B?
提示 先加入試劑A，造成堿性環(huán)境，只有在堿性環(huán)境中，蛋白質才容易與Cu2＋發(fā)生顏色反應。
(6)鑒定蛋白質時，加入試劑B后，如果沒有產生紫色反應，可能的原因是什么？
提示 可能加入的雙縮脲試劑B過量，CuSO4在堿性溶液中生成大量的藍色Cu(OH)2絮狀沉淀，會遮蔽實驗中所產生的紫色，影響觀察結果。
(7)脂肪鑒定實驗中為什么用50%的酒精洗去浮色，而不用清水？
提示 因為蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ易溶于有機溶劑酒精中，而不溶于清水中。
[技法提煉]
1.利用“一同三不同”區(qū)分斐林試劑與雙縮脲試劑
“一同”是指都含有NaOH和CuSO4兩種成分，且NaOH溶液的質量濃度都為0.1 g/mL。
“三不同”分別指：(1)使用原理不同。斐林試劑的實質是新配制的Cu(OH)2溶液，雙縮脲試劑的實質是堿性環(huán)境中的Cu2＋。
(2)使用方法不同。鑒定還原糖時將甲、乙兩液等量混勻后立即使用；鑒定蛋白質時先加A液1 mL搖勻，然后加B液4滴，振蕩搖勻。
(3)CuSO4溶液的濃度不同。斐林試劑中CuSO4溶液的質量濃度為0.05 g/mL，雙縮脲試劑中CuSO4溶液的質量濃度為0.01 g/mL。
2.三類有機物檢測在操作步驟上的差異
(1)唯一需要加熱——還原糖檢測，且必須水浴加熱，不能用酒精燈直接加熱。若不加熱，則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。
(2)唯一需要顯微鏡——脂肪檢測。
(3)混合后加入——斐林試劑；分別加入——雙縮脲試劑(先加A液，后加B液，且B液不能過量)。
三、觀察DNA和RNA在細胞中的分布
1.實驗原理
(1)甲基綠和吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同：甲基綠＋DNA→綠色；吡羅紅＋RNA→紅色。
(2)鹽酸能改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時可使染色質中的DNA與蛋白質分離，有利于DNA和染色劑結合。
2.實驗步驟
[深度思考]
(1)實驗選材時，為何不選用紫色洋蔥外表皮細胞或葉肉細胞？
提示 紫色洋蔥外表皮細胞含紫色液泡，葉肉細胞含葉綠體，易對實驗結果造成顏色干擾。
(2)不能用哺乳動物成熟紅細胞觀察DNA和RNA分布的原因是什么？
提示 哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核，沒有DNA。
(3)制片時，為何滴加0.9%的NaCl溶液？
提示 0.9%的NaCl溶液可以保持口腔上皮細胞的正常形態(tài)。
(4)水解之前，為何用酒精燈烘干載玻片？
提示 烘干可迅速殺死并固定細胞，否則細胞內的溶酶體會對核酸造成破壞。
(5)觀察DNA和RNA在細胞中分布的實驗中，用緩水流沖洗載玻片的目的是什么？
提示 防止細胞被水流沖走。
(6)由上述實驗得到的實驗結論是什么？
提示 DNA主要分布在細胞核中，RNA主要分布在細胞質中。
[易錯警示]
觀察DNA和RNA在細胞中的分布實驗的注意事項
(1)吡羅紅甲基綠染色劑：混合使用，且現(xiàn)用現(xiàn)配。
(2)DNA和RNA在細胞核和細胞質中均有分布，只是量不同，故結構中強調“主要”而不能說“只”存在于細胞核或細胞質中。
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